His-Avi标签则进一步方便了蛋白的纯化和检测,使其在实验室应用中更加便捷。
T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。
功能与特性
错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。
高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。
应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
在CRISPR基因编辑中的应用
在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下:
PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。
变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。
酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。
通过阻断CD40与CD40L的相互作用,可以抑制过度的免疫反应,用于治疗自身免疫性疾病。
重组人C反应蛋白(Recombinant Human C-Reactive Protein, CRP)是一种通过基因工程技术生产的蛋白质,它在炎症反应和免疫调节中发挥着重要作用。C反应蛋白是一种急性期蛋白,主要由肝脏合成,其水平在炎症、感染或其他组织损伤时会显著升高,因此被广泛用作炎症和感染的生物标志物。
C反应蛋白最初是在肺炎链球菌感染患者的血清中发现的,因其能够与肺炎球菌的C多糖发生反应而得名。CRP是一种五聚体蛋白,具有多种生物学功能。它可以结合到受损细胞和病原体表面的磷脂酰胆碱,激活补体系统,促进吞噬细胞的吞噬作用,从而帮助清除病原体和细胞碎片。此外,CRP还能够调节炎症反应的强度,通过与免疫细胞表面的受体结合,抑制过度的炎症反应,保护机体免受自身免疫损伤。
重组人C反应蛋白的制备利用了基因工程技术,通过将CRP基因插入适合的表达载体中,并在宿主细胞中高效表达,获得高纯度的重组蛋白。这种重组蛋白保留了天然CRP的生物学活性,可用于多种研究和临床应用。在基础研究中,重组CRP可用于研究炎症反应的机制、免疫细胞的激活以及CRP与其他炎症介质的相互作用。
通过研究GDF15在疾病模型中的表达变化和功能异常,可以深入了解其在疾病发生发展过程中的作用机制。
Recombinant Human NPC2 Protein, His Tag 是一款由 CHO 细胞分泌表达的溶酶体胆固醇转运蛋白,含 151 个氨基酸的成熟序列,C 端融合 6×His 标签,分子量约 19 kDa。蛋白经过两步纯化——镍柱亲和层析与分子筛精纯,纯度≥98%,内毒素70 % 胆固醇转移,EC₅₀≈0.2 μM;其活性可被 U18666A 竞争性抑制,验证体系特异性。冻干粉于 –20 ℃ 可保存 24 个月,4 ℃ 复溶后活性保持 7 天,适用于胆固醇代谢、尼曼-匹克病 C 型机制研究及小分子筛选。提供每批质谱、圆二色谱及功能报告,确保实验可重现,是脂质转运研究的高效工具。
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IL - 36α 还可能在其他炎症性疾病(如炎症性肠病、类风湿关节炎等)的治疗中发挥重要作用。
重组食蟹猴AMIGO2蛋白(Recombinant Cynomolgus AMIGO2 Protein, His Tag)是一种通过重组技术生产的蛋白质,为研究神经发育和相关疾病提供了重要的工具。AMIGO2(Adhesion Molecule with Ig-like Domain 2)是一种含有免疫球蛋白样结构域的黏附分子,主要在神经系统中表达,参与调节神经元的发育、突触形成和神经信号传导。
在神经系统中,AMIGO2通过其免疫球蛋白样结构域与其他细胞表面分子相互作用,调节神经元的黏附和信号转导。研究表明,AMIGO2在神经发育过程中发挥关键作用,能够促进神经元的迁移、突起生长和突触形成。此外,AMIGO2还参与调节神经元的兴奋性和神经信号传导,影响学习和记忆等高级神经功能。由于其在神经系统中的重要作用,AMIGO2的异常表达或功能失调与多种神经发育障碍和神经退行性疾病相关。
重组食蟹猴AMIGO2蛋白的开发为研究其功能提供了强大的技术支持。通过重组DNA技术和His Tag(组氨酸标签)的添加,该蛋白的纯度和稳定性得到显著提高,便于后续的实验操作和检测。
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它通过与细胞表面受体结合,激活下游信号通路,从而增强免疫细胞的活性,促进炎症反应和免疫细胞的增殖。
T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶,具有独特的酶活性和广泛的应用价值。它能够催化DNA的5'→3'方向合成,同时具备3'→5'核酸外切酶活性,但不具有5'→3'核酸外切酶活性。这种酶在分子生物学实验中被广泛应用于多种场景。
工作原理
T4 DNA聚合酶的活性依赖于模板和引物的存在。它通过识别单链DNA模板上的引物,从5'端向3'端合成新的DNA链。此外,它还具有3'→5'外切酶活性,能够在没有dNTPs的情况下,按3'→5'方向降解双链DNA。这种外切酶活性在存在特定dNTP时会被抑制,例如当反应体系中仅存在dGTP时,酶会在遇到G碱基时停止降解。
应用
T4 DNA聚合酶在分子克隆中具有重要应用。例如,在In-Fusion克隆技术中,它利用3'→5'外切酶活性生成单链5'突出端,通过互补序列的退火实现DNA片段的无缝连接。此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。
在高通量测序(NGS)中,T4 DNA聚合酶用于文库构建,通过平滑DNA末端或添加特定序列,提高测序效率。它还被用于位点特异性突变、DNA末端标记等应用。
其糖链末端唾液酸化修饰可阻断抗体识别,提示糖基化异质性是临床检测假阴性的潜在原因。
单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1,也称为CCL2)是一种重要的趋化因子,属于CC趋化因子家族。它在免疫系统中发挥着关键作用,主要通过调节免疫细胞的迁移和激活来维持免疫平衡。MCP-1广泛存在于多种细胞和组织中,包括单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞和成纤维细胞等。
MCP-1的结构与功能
MCP-1是一种小分子蛋白,由76个氨基酸组成,分子量约为8.8kDa。它通过与特定的G蛋白偶联受体CCR2结合,发挥其生物学功能。MCP-1的受体CCR2主要表达在单核细胞、巨噬细胞和某些T细胞亚群上。
在免疫细胞迁移中的作用
MCP-1在免疫细胞的迁移中起着重要作用。它能够吸引单核细胞、巨噬细胞和某些T细胞亚群向炎症部位迁移,从而增强免疫反应。例如,在感染或组织损伤时,MCP-1的释放能够引导免疫细胞迅速到达受损组织,发挥免疫监视和清除功能。
在炎症反应中的作用
MCP-1不仅促进免疫细胞的迁移,还参与调节炎症反应。它能够增强单核细胞和巨噬细胞的吞噬能力,促进其对病原体和受损细胞的清除。此外,MCP-1还能够调节T细胞的活化和分化,影响免疫反应的类型和强度。
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