其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,确保实验结果的准确性和可靠性是至关重要的。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,为研究人员提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案,特别适用于需要高特异性和高灵敏度的实验场景。
低浓度ROX与UDG技术的双重优势
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)整合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于某些需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
产品特点
低浓度ROX校正:该试剂盒中的ROX浓度经过优化,适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,同时避免高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。
SYBR Green qPCR Mix通过比较目标基因与参考基因的Ct值,实现基因表达水平的定量分析
溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。
25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液广泛应用于核酸的琼脂糖凝胶电泳实验中。
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF,Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor)是一种重要的造血生长因子,广泛参与细胞增殖、分化和免疫调节。在人体中,GM-CSF主要作用于骨髓中的粒系和巨噬系祖细胞,促进其增殖和分化,从而维持外周血中中性粒细胞和巨噬细胞的正常水平。特别是通过毕赤酵母(Pichia pastoris)表达的人源GM-CSF(GM-CSF, Human, P. pastoris-expressed),因其高效性和稳定性,成为生物医学研究和临床应用中的重要工具。
GM-CSF的结构与功能
GM-CSF是一种单链多肽,由127个氨基酸组成,具有高度的保守性和生物活性。它通过与细胞表面的GM-CSF受体结合,激活一系列细胞内信号通路,如JAK-STAT、PI3K-Akt和MAPK通路,从而促进粒系和巨噬系细胞的增殖和分化。GM-CSF还能够调节免疫细胞的存活和功能,增强其吞噬和杀菌能力。
毕赤酵母表达的优势
毕赤酵母(Pichia pastoris)是一种常用的重组蛋白表达系统,具有高效表达和正确折叠的特点。
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此外,M-CSF(大鼠)在血液学研究中也有着广泛的应用。
粒细胞集落刺激因子(G-CSF,Granulocyte Colony-Stimulating Factor)是一种重要的造血生长因子,广泛存在于包括小鼠在内的多种哺乳动物中。在小鼠模型中,G-CSF主要作用于骨髓中的粒系祖细胞,促进其增殖、分化和成熟,从而维持外周血中中性粒细胞的正常水平。G-CSF在小鼠的免疫防御和炎症反应中发挥着关键作用,是生物医学研究中的重要工具。
G-CSF的结构与功能
小鼠G-CSF是一种单链多肽,由174个氨基酸组成,具有高度的保守性和生物活性。它通过与细胞表面的G-CSF受体结合,激活一系列细胞内信号通路,如JAK-STAT、PI3K-Akt和MAPK通路,从而促进粒系细胞的增殖和分化。G-CSF还能够调节粒细胞的存活和功能,增强其吞噬和杀菌能力。
在生理过程中的作用
在小鼠模型中,G-CSF在维持正常造血功能中发挥着重要作用。它能够促进骨髓中的粒系祖细胞增殖和分化,生成成熟的中性粒细胞,从而维持外周血中中性粒细胞的正常水平。中性粒细胞是小鼠免疫系统的重要组成部分,能够迅速响应病原体入侵,发挥吞噬和杀菌作用。

在细胞的精细调控机制中,蛋白质的降解过程对于维持细胞内环境的稳定至关重要。
2× DNA/RNA变性PAGE胶上样缓冲液是一种2倍浓缩的核酸电泳上样缓冲液,专门用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。它通过变性处理,确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,从而实现更清晰的分离效果。
主要成分
该缓冲液的主要成分包括:
甲酰胺:用于变性核酸,确保核酸以单链形式迁移。
SDS:一种阴离子表面活性剂,有助于核酸的变性。
溴酚蓝和二甲苯青:作为电泳指示剂,便于观察电泳进程。
EDTA:螯合金属离子,防止核酸降解。
使用方法
样品准备:将核酸样品与2×变性PAGE胶上样缓冲液按1:1比例混合,使最终浓度为1×。
变性处理:将混合后的样品在95℃加热5分钟,然后迅速冷却至冰上。
上样:将处理后的样品加入聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中。
电泳:在适当的电压下进行电泳,直至指示剂迁移至凝胶的合适位置。
优势
高效变性:确保核酸在电泳过程中以单链形式迁移,提高分离效果。
清晰指示:溴酚蓝和二甲苯青作为指示剂,便于实时观察电泳进程。
高纯度:无RNase污染,确保RNA样品的完整性。
它通过与中性粒细胞表面的CXCR1和CXCR2受体结合,激活中性粒细胞,促进其脱颗粒和释放炎症介质。
TNF-α(肿瘤坏死因子 - α,小鼠,带组氨酸标签)是一种重要的多肽细胞因子,在炎症反应、免疫调节和细胞凋亡中发挥着关键作用。通过在 TNF-α 的氨基酸序列末端添加组氨酸标签(His-tag),研究人员能够更高效地纯化和检测该蛋白,使其在生物医学研究中具有重要应用价值。
结构与功能
TNF-α 是一种由 233 个氨基酸组成的多肽,主要由巨噬细胞、单核细胞和某些淋巴细胞分泌。它通过与两种细胞表面受体(TNFR1 和 TNFR2)结合,激活下游信号通路,从而调节细胞的增殖、分化、存活和凋亡。TNF-α 在炎症反应中起着核心作用,能够促进炎症因子的产生和释放,增强免疫反应。
组氨酸标签的优势
组氨酸标签(His-tag)是一种常用的蛋白质工程技术,通过在目标蛋白的氨基酸序列末端添加 6-8 个组氨酸残基,使得蛋白质能够与金属离子(如镍或钴)高效结合。这种特性使得带有组氨酸标签的 TNF-α 可以通过金属离子亲和色谱(IMAC)进行高效纯化,从而获得高纯度的蛋白样品。此外,组氨酸标签还便于蛋白质的检测和定量分析,提高了实验的准确性和重复性。
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