它不仅具有与传统溴化乙锭(EB)相当的灵敏度,还具有更高的安全性和特异性。
3×甲酰胺凝胶上样缓冲液是一种专门用于核酸电泳的辅助试剂,特别适用于RNA样品的变性电泳。它能够帮助核酸样品在琼脂糖凝胶电泳中更好地沉入加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分该缓冲液的主要成分包括:
90% 甲酰胺(Formamide):用于变性核酸,使其保持单链状态。0.075% 二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 0.075% 溴酚蓝(Bromophenol Blue):作为示踪染料,用于观察电泳的进程。30 mM EDTA:螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。使用方法样品混合:将 2 μL 的 3×甲酰胺凝胶上样缓冲液与 4 μL 的核酸样品混合。变性处理:将混合后的样品在 70℃加热变性 5-15 分钟,然后立即置于冰上冷却,以防止核酸复性。电泳上样:将处理后的样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景3×甲酰胺凝胶上样缓冲液主要用于RNA样品的变性电泳,适用于甲醛变性或非变性的琼脂糖凝胶电泳以及聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可用于寡聚单链DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳。储存条件该缓冲液应冷藏保存(2-8℃),以确保其稳定性和有
在琼脂糖凝胶电泳中DL2000DNAMarker可作为分子量标准帮助研究人员快速判断DNA片段的长度
碱性凝胶加样缓冲液(6×)是一种6倍浓缩的DNA上样缓冲液,专为碱性琼脂糖凝胶电泳设计。它以溴酚蓝和二甲苯青FF为指示剂,稀释至1×后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于电泳指示。产品特性主要成分:溴甲酚绿、二甲苯青FF、Ficoll 400、NaOH和EDTA。保存条件:室温避光保存,有效期为12个月。用途:主要用于碱性琼脂糖凝胶电泳。使用方法稀释:将6×碱性凝胶加样缓冲液与DNA样品按1:5的比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。
避免污染:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。开封后尽快使用:试剂开封后应尽快使用,以防影响后续实验效果。碱性凝胶加样缓冲液(6×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为碱性琼脂糖凝胶电泳实验中的理想选择。
6×DNA 在不同浓度的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝和二甲苯青的迁移速率稳定,为实验提供可靠的参考
T7 Endonuclease I(T7EI)是一种来源于T7噬菌体的核酸内切酶,能够特异性识别并切割DNA中的错配碱基对、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA以及异源双链DNA。这种酶在基因编辑领域,尤其是CRISPR-Cas9技术中,被广泛用于检测基因突变和编辑效率。
功能与特性
错配识别:T7EI能够识别DNA中的不完全配对碱基对,并在错配位点的5'端切割第一、第二或第三个磷酸二酯键。
高特异性:该酶对特定DNA结构具有高度特异性,能够有效区分野生型和突变型DNA。
应用广泛:除了用于基因编辑效果的检测,T7EI还可用于分解四方向交叉DNA、检测或切割异源双链DNA、随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
在CRISPR基因编辑中的应用
在CRISPR-Cas9基因编辑中,T7EI常用于检测目标基因是否成功引入突变。具体步骤如下:
PCR扩增:分别以野生型和突变型DNA为模板,扩增包含突变位点的DNA片段。
变性与退火:将PCR产物变性后退火,形成异源双链DNA。
酶切反应:加入T7EI,在37℃下反应15-30分钟,通过琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果。

对肠道病毒RNA进行4倍稀释系列检测,结果显示One Step RT-qPCR能够以更高的灵敏度检测
甲酰胺加样缓冲液(2×)是一种专为RNA电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成,能够为RNA电泳提供稳定的环境和清晰的指示。产品特性成分:主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成。指示剂:以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为1年。使用方法稀释:将2×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品等比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。

实验表明,Probe qPCR在宽广的定量范围内能够获得良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量。
磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,广泛应用于PCR产物纯化、DNA片段回收以及核酸提取等领域。它利用磁珠与核酸的特异性结合,通过简单的操作流程实现高效、快速的核酸纯化。工作原理该试剂盒的核心在于磁珠表面的特殊修饰,使其能够与核酸分子特异性结合。在特定的缓冲液条件下,核酸会吸附到磁珠表面,而杂质(如蛋白质、引物、dNTP等)则被洗去。通过磁场分离,纯化的核酸可以从磁珠上洗脱下来,用于后续实验。产品特点高效回收:对于80 bp至50 kb的DNA片段,回收效率可达95%以上。操作简便:无需离心,整个纯化过程仅需20-30分钟。高通量化:可同时处理多个样本,适合高通量实验。兼容性强:适用于多种下游应用,如PCR、酶切、测序等。应用场景磁珠法PCR/DNA纯化试剂盒广泛应用于以下领域:PCR产物纯化:去除引物、dNTP等杂质,提高PCR产物的纯度。DNA片段回收:从酶切反应液中回收目标DNA片段。高通量测序:纯化后的DNA可用于文库构建和测序。使用方法混合磁珠溶液:将磁珠溶液加入PCR反应液中,混合均匀。
将 4S Green 加入冷却至 50-60℃的琼脂糖溶液中,使其终浓度为 1×,轻轻混合后倒胶。
T5核酸外切酶(T5 Exonuclease)是一种沿5'→3'方向降解DNA的核酸外切酶,能够从DNA的5'末端或线性/环状双链DNA的缺口(gap)或切刻(nick)处起始消化。它对超螺旋双链DNA无作用,并且具有单链DNA核酸内切酶活性。
特性与应用
高效降解:T5核酸外切酶能够高效降解线性单链和双链DNA,以及切刻的质粒DNA。
无缝克隆:在无缝克隆技术中,T5核酸外切酶用于从DNA片段的5'端切割一条链,产生3'突出末端,促进互补片段的退火配对,进而通过DNA聚合酶填补缺口,最后由DNA连接酶修复缺刻,形成完整的环状质粒。
Gibson组装:T5核酸外切酶在Gibson组装中发挥关键作用,通过从DNA片段的5'末端开始消化,产生互补的单链3'末端,促进片段退火和连接。
去除污染:该酶可用于去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性DNA,提高DNA克隆效率。
使用方法
储存条件:T5核酸外切酶通常保存于-20℃,有效期可达3年。
反应条件:在37℃下反应30分钟,加入至少11 mM EDTA或含有SDS的DNA Loading Buffer终止反应。
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