In-Fusion Cloning Kit 由Takara公司推出,是市场上最受欢迎的无缝克隆试剂盒
MOPS电泳缓冲粉剂(1×)是一种专为核酸电泳设计的缓冲液,广泛应用于RNA和DNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。MOPS(3-吗啉丙磺酸)是一种两性离子缓冲剂,具有良好的缓冲能力和稳定性,特别适用于中性pH条件下的核酸分离。产品特性成分:主要由MOPS、乙酸钠和EDTA组成。缓冲范围:pKa值为7.2,有效缓冲范围为pH 6.5-7.9。稳定性高:室温保存,有效期长达1年。即用型设计:粉剂形式,使用时只需用去离子水或双蒸水溶解。使用方法配制1×工作液:取一包MOPS电泳缓冲粉剂,倒入洁净的烧杯中。加入约800 mL去离子水或双蒸水,搅拌溶解。定容至1000 mL,混匀后即可使用。电泳操作:将配制好的1×MOPS缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温避光保存,未开封的产品有效期为1年。
它能够在室温下仅需5分钟完成黏性末端或平末端DNA的连接反应,连接效率与标准1小时连接反应相当。
MgCl₂ (100 mM, DEPC-treated) 是一种经过DEPC处理的无RNA酶、无DNA酶和无蛋白酶污染的100 mM氯化镁溶液,广泛应用于分子生物学实验。
产品特点
无核酸酶污染:经过DEPC处理,确保无RNase、DNase和蛋白酶污染,适合RNA和DNA相关实验。
高纯度:纯度高,适合多种分子生物学实验。
稳定性高:在-20℃条件下可稳定保存至少一年。
应用广泛:适用于T4 RNA Ligase 2催化反应、PCR反应、制备缓冲液提供Mg²⁺离子来源及其他需要Mg²⁺离子的实验。
使用注意事项
保存条件:建议在-20℃保存,避免反复冻融。
操作环境:使用时需在洁净空间进行,谨防环境下的杂酶对液体造成污染。
个人防护:操作时需穿实验服并戴一次性手套。
MgCl₂ (100 mM, DEPC-treated) 凭借其无污染、高纯度和稳定性,已成为分子生物学实验中不可或缺的试剂,特别适合需要高纯度和高效率的实验。
在细胞的生理过程中,RNase R的一个重要功能是参与细胞内RNA的降解和更新。
2×TBE-Urea 上样缓冲液是一种专门用于变性核酸电泳的试剂,能够有效解除核酸的二级结构,使其保持单链构型,从而实现更清晰的电泳分离效果。组成成分该缓冲液的主要成分包括:尿素(Urea):用于解除核酸的二级结构,保持核酸的单链状态。
溴酚蓝(Bromophenol Blue) 和 二甲苯青(Xylene Cyanol FF):作为示踪染料用于观察电泳的进程。Tris、硼酸和 EDTA:维持电泳过程中的缓冲体系,确保电泳条件的稳定。聚蔗糖(Ficoll):增加样品密度,帮助样品沉入凝胶孔中。使用方法样品处理:将 2×TBE-Urea 上样缓冲液与待测核酸样品按 1:1 比例混合70℃加热 3-5 分钟,使核酸充分变性,之后立即置于冰上冷却。上样与电泳:将处理后的样品加入变性聚丙烯酰胺凝胶的加样孔中,进行电泳。应用场景2×TBE-Urea 上样缓冲液主要用于单链 DNA(ssDNA)和 RNA 的变性凝胶电泳,广泛应用于基因分型检测(如 SSR 标记、AFLP、RFLP 等)。它不适用于非变性凝胶电泳或蛋白电泳。
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高灵敏度:对核酸的迁移影响小,信噪比高,荧光信号强,背景信号低。
RcView 吖啶橙核酸染料是一种新型的荧光染料,专为核酸染色设计,可广泛应用于琼脂糖凝胶电泳和细胞染色实验中。它不仅具有与传统溴化乙锭(EB)相当的灵敏度,还具有更高的安全性和特异性。产品特性RcView 吖啶橙核酸染料是一种细胞可渗透的荧光染料,能够与核酸结合并发出强烈的荧光信号。在紫外光下,双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA或RNA则呈现红色荧光。这种特性使其能够清晰地区分DNA和RNA,适用于多种核酸分析实验。安全性与传统的溴化乙锭(EB)相比,RcView 吖啶橙核酸染料经过多项致突变性试验验证,结果均为阴性,是一种更安全的替代品。这使得它在实验室使用中更加环保和安全,减少了对实验人员和环境的风险。
使用方法RcView 吖啶橙核酸染料的使用方法与溴化乙锭(EB)相同,操作简便。在琼脂糖凝胶电泳中,只需将RcView加入凝胶溶液中,轻轻摇匀后倒胶即可。电泳完成后,可在紫外灯下直接观察核酸条带,无需额外的脱色或洗涤步骤。应用范围RcView 吖啶橙核酸染料不仅适用于DNA和RNA的凝胶电泳分析,还可用于细胞染色实验。它能够透过细胞膜,使细胞核中的DNA和RNA染
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5×RNA Loading Buffer适用于多种RNA电泳实验,包括非变性琼脂糖凝胶电泳和变性琼脂
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,提供了一种高效、防污染的qPCR解决方案,确保实验结果的准确性和可靠性。
UDG技术的防污染机制
Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus)的核心优势在于其整合了UDG技术。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在高温变性步骤中(通常95℃),UDG会迅速失活,不会影响后续的qPCR反应。这种机制有效减少了假阳性结果,提高了实验的可靠性。
产品特点
高效防污染:UDG技术能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室中的残留产物污染,从而减少假阳性结果。
One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)还具备高灵敏度和高特异性的
Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)是一种位点特异性重组酶,最早于1981年从P1噬菌体中发现。它能够识别并结合特定的DNA序列——LoxP位点,进而引发DNA重组。LoxP位点是一个34bp的DNA序列,包含两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔区。
工作原理
Cre重组酶通过与LoxP位点的反向重复序列结合形成二聚体,进而形成四聚体复合物。随后,Cre重组酶切割LoxP位点之间的DNA片段,并通过DNA连接酶重新连接切口。重组结果取决于LoxP位点的方向和位置。例如:
若两个LoxP位点方向相同,Cre重组酶可切除它们之间的DNA片段。
若方向相反,则可导致DNA片段翻转。
若LoxP位点位于不同DNA链上,Cre重组酶可介导DNA链交换或染色体易位。
应用
Cre/LoxP系统广泛应用于基因编辑领域,包括基因敲除、基因插入、基因翻转和染色体重排等。它特别适合构建条件性基因敲除小鼠模型,通过组织特异性启动子控制Cre重组酶的表达,从而实现对特定组织或细胞中目标基因的时空特异性敲除。
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