4S Green Plus 的储存条件为2-8℃,使用时需遵循实验室安全操作规程,避免直接接触皮肤。
甲酰胺加样缓冲液(2×)是一种专为RNA电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成,能够为RNA电泳提供稳定的环境和清晰的指示。产品特性成分:主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成。指示剂:以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为1年。使用方法稀释:将2×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品等比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心手段,而Hot-Start Taq Master Mix (2×)(无染料)则是这一技术的升级版,为实验人员提供了一个高效、精准且便捷的PCR反应体系。
Hot-Start Taq Master Mix (2×)是一种预配制的双倍浓度PCR反应混合液,专为提高PCR反应的特异性和灵敏度而设计。它结合了Hot-Start技术与Taq DNA聚合酶的优势,同时省略了染料成分,为后续的实验操作提供了更大的灵活性。
Hot-Start技术是该Master Mix的核心亮点。传统Taq酶在室温下即可表现出活性,容易导致引物的非特异性结合和扩增产物的背景噪声。而Hot-Start Taq Master Mix通过化学修饰或抗体结合的方式,使Taq酶在室温下处于“关闭”状态,只有在高温变性步骤(通常在95℃)时才会被激活。这种机制有效避免了非特异性扩增,尤其适用于复杂模板或低丰度目标基因的扩增。
EB具有较强的诱变性和毒性,操作时应佩戴手套和实验服,避免直接接触皮肤。
溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。
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其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。
T4 UvsX Recombinase是一种来源于T4噬菌体的重组酶,属于RecA/Rad51家族的同源体,广泛应用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)技术中。该酶能够与单链DNA(ssDNA)结合并形成核酸蛋白复合物,通过寻找与双链DNA(dsDNA)的同源序列进行链置换反应,从而实现等温条件下的高效DNA扩增。产品特性高效结合与置换:T4 UvsX Recombinase能够稳定ssDNA,并在dsDNA中寻找同源序列,完成链置换反应。无核酸酶活性:该酶本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。温和反应条件:可在37-42℃的等温条件下进行反应,适合快速、灵敏的核酸扩增。应用场景T4 UvsX Recombinase是RPA技术的核心组分之一,广泛应用于以下领域:病原体检测:可用于检测多种DNA和RNA病原体,如中东呼吸综合征(MERS)、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19,检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断(POCT):因其快速、简便的特点,非常适合现场快速诊断试剂的开发。
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缓冲液中的 Tris-HCl 和 EDTA 组分能够维持电泳过程中的稳定环境。
GTBE电泳缓冲液(1×)是一种专为DNA脉冲场凝胶电泳设计的缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它由甘氨酸和TBE(Tris-Borate-EDTA)组成,能够提供稳定的电泳环境,特别适用于分离相对较小(小于2000 bp)的DNA片段。产品特性成分:主要由TBE缓冲液、甘氨酸和防腐剂等组成。缓冲能力:缓冲能力较弱,适合分离小于2000 bp的DNA片段。即用型设计:1×浓度,无需稀释,直接使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法制备凝胶:使用1×GTBE缓冲液制备琼脂糖凝胶。加样:将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中。电泳条件:适用于脉冲场凝胶电泳,电泳电压和时间根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的DNA染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察DNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后尽快使用。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
RcView吖啶橙具有良好的膜通透性,能够自由穿过细胞膜,对细胞的生理状态干扰较小。这一特性使其适用
Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。
工作原理
Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤:
复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。
切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。
结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。
应用场景
NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。
单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。
ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。
CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。
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