在基因克隆和重组DNA技术中,DNA Marker II 可用于鉴定质粒酶切产物的大小,验证基因片段
phi29 DNA Polymerase 是一种来源于 Bacillus subtilis 噬菌体 phi29 的重组酶,经过基因工程改造后,具有卓越的链置换和持续合成能力。它能够在等温条件下高效扩增DNA,生成长达70 kb的DNA片段。
特性与优势
高持续合成能力:phi29 DNA Polymerase 可以连续合成超过70 kb的DNA片段,无需从模板上解离。
高保真性:具有3′→5′外切酶校正活性,保真性比Taq DNA Polymerase高100倍。
链置换活性:能够高效置换DNA链,适合滚环扩增(RCA)和多重置换扩增(MDA)。
温和反应条件:反应温度通常为37-42℃,适合等温扩增。
应用场景
全基因组扩增(WGA):用于单细胞测序、病原微生物检测和宏基因组研究。
滚环扩增(RCA):生成周期性DNA纳米模板,适用于测序模板制备。
多重置换扩增(MDA):用于无偏扩增全基因组。
高GC含量模板扩增:在NGS测序中,能够提升高GC含量和复杂模板的扩增效率。
使用方法
储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
反应条件:37-42℃孵育1-3小时,65℃加热10分钟失活。
溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的技术,用于分离和分析DNA片段。而6×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。
6×DNA Loading Buffer是一种六倍浓缩的上样缓冲液,主要用于DNA凝胶电泳。它含有甘油、EDTA、溴酚蓝和二甲苯青FF等成分。其中,甘油可以增加样品的密度,使样品沉入凝胶加样孔中,防止样品漂浮;EDTA则用于螯合金属离子,防止DNA降解。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。
使用6×DNA Loading Buffer时,通常按照1:5(Loading Buffer:DNA样品)的比例混合。例如,对于5μL的DNA样品,加入1μL的6×Loading Buffer,混匀后即可加样。这种缓冲液适用于多种浓度的琼脂糖凝胶,溴酚蓝在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶中的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。
dATPSolution(100 mM) 经严格检测,无DNase和RNase污染保证实验结果可靠
在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。组成成分3×甲酰胺凝胶上样缓冲液的主要成分包括:甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,使其保持单链状态,避免核酸在电泳过程中形成二级结构,从而实现更准确的分子量测定。二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚(Bromophenol Blue):这两种染料作为示踪剂,可帮助观察电泳的进程。二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。EDTA(乙二胺四乙酸):螯合二价金属离子,防止核酸被核酸酶降解,同时维持电泳过程中的缓冲环境。使用方法样品混合:将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,使核酸充分变性。加热后立即置于冰上冷却,以防止核酸重新折叠。电泳上样:将处理后的样品加入凝胶的加样孔中,进行电泳。

λ DNA/HindIII酶切产物是琼脂糖凝胶电泳中常用的分子量标准用于快速准确地估算DNA片段大小
Bst Plus DNA Polymerase 是一种经过基因工程改造的嗜热DNA聚合酶,来源于 Thermophilic Geobacillus sp. DNA Polymerase I,去除了其5′→3′核酸外切酶活性。该酶具有强大的5′→3′ DNA聚合酶活性、链置换活性以及对dUTP的耐受性,非常适合用于防污染的等温扩增反应。产品特性高灵敏度:在LAMP等温扩增反应中,灵敏度低至50 copies/T,反应时间小于15分钟。耐盐性和热稳定性:相比野生型Bst DNA聚合酶,Bst Plus在耐盐性和热稳定性方面表现更优,能够在65℃的等温条件下高效工作。dUTP耐受性:具有较高的dUTP耐受性,适合防污染的等温扩增反应。应用场景Bst Plus DNA Polymerase 广泛应用于以下领域:环介导等温扩增(LAMP):快速、灵敏地检测病原体,适用于现场检测和即时诊断。链置换扩增(SDA):用于高灵敏度的核酸扩增。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。使用方法储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
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在使用前,需将 25×聚蔗糖凝胶上样缓冲液稀释至所需浓度(如 6× 或 5×)。
50×TBE液体是一种高浓度的核酸电泳缓冲液,广泛应用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。TBE是Tris-Borate-EDTA的缩写,其主要成分包括Tris(氨基三羟甲基甲烷)、硼酸(Boric Acid)和EDTA(乙二胺四乙酸)。这种缓冲液因其高缓冲能力和良好的电泳性能而备受青睐。产品特性高缓冲能力:TBE缓冲液的缓冲能力较强,适合长时间电泳,能够维持稳定的pH值。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的小分子DNA片段,能够提供更高的分辨率。即用型设计:50×TBE液体为浓缩液,使用时只需用去离子水稀释即可,方便快捷。使用方法配制1×TBE工作液:取20 mL的50×TBE液体,加入980 mL去离子水,充分混匀。电泳条件:凝胶浓度:通常使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:建议4-10 V/cm,电泳时间根据片段大小调整。保存条件:室温保存,有效期一般为12个月。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。缓冲液更换:TBE缓冲液的缓冲能力较强,但长时间电泳可能导致电泳槽过热,建议使用循环装置或及时更换工作液。
在模拟污染实验中,dUTP/UDG防污染系统能够有效降解含尿嘧啶的DNA污染,避免了假阳性结果的出现
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,结合了经典的SDS碱裂解法和磁珠吸附技术,能够从大肠杆菌中快速、高效地提取高质量的质粒DNA。工作原理该试剂盒利用磁珠表面修饰的官能团,在高盐条件下特异性吸附质粒DNA,而杂质如蛋白质、盐离子等则通过洗涤液被去除。当条件改变时,质粒DNA从磁珠表面洗脱下来,从而实现快速分离和纯化。产品特点高效提取:从2 mL过夜培养的菌液(OD600 = 2.0)中可获得超过15 μg的高拷贝质粒DNA。操作简便:无需多次离心,整个提取过程可在1小时内完成,适合高通量操作。纯度高:提取的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8-1.9,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于下游实验。自动化兼容:可与自动化核酸提取仪配合使用,实现完全自动化操作。
应用场景提取的质粒DNA可用于多种下游应用,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等分子生物学实验。使用方法菌液处理:取适量菌液离心,弃上清后用裂解液悬浮细菌沉淀。裂解与吸附:加入裂解液和中和液,裂解细胞后加入磁珠,吸附质粒DNA。
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