在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。
牛痘DNA拓扑异构酶I(Vaccinia DNA Topoisomerase I)是一种来源于牛痘病毒的I型拓扑异构酶,通过基因重组技术制备和纯化。它能够特异性识别双链DNA中的5'-(C/T)CCTT-3'序列,并在该序列的最后一个T和其之后的磷酸二酯键处切割DNA。切割后,酶与DNA的3'末端形成共价复合物,随后可利用DNA的5'羟基重新连接,释放酶并完成修复。
功能与应用
牛痘DNA拓扑异构酶I具有解旋超螺旋DNA的能力,可将超螺旋DNA转化为松弛的双链环状DNA,便于后续的酶切等操作。此外,它还可用于DNA连接,无需ATP或DNA连接酶即可完成。这使得它在TOPO克隆中表现出色,能够在5分钟内高效连接DNA片段,无需传统连接酶。它还被广泛应用于NGS建库中的接头连接。
实验操作
在实验中,牛痘DNA拓扑异构酶I通常在37℃下孵育,反应体系中需包含特定的反应缓冲液。该酶的最佳反应温度为37℃,且可通过80℃加热20分钟使其失活。由于其高效性和特异性,它已成为分子生物学实验中不可或缺的工具酶。
尽管 IL - 11 的生物学功能和临床应用前景令人兴奋,但其复杂的调节机制仍需进一步研究。
表皮调节素(EREG)是一种重要的细胞因子,属于表皮生长因子(EGF)家族。它在人体细胞生长、分化和信号传导中发挥着关键作用,广泛参与多种生理和病理过程。
EREG的生物学功能
EREG通过与表皮生长因子受体(EGFR)结合发挥作用。它能够促进多种细胞的增殖和分化,包括上皮细胞、成纤维细胞和某些免疫细胞。EREG在维持组织稳态和促进伤口愈合方面具有重要作用。例如,在皮肤损伤时,EREG能够刺激上皮细胞的增殖和迁移,加速伤口愈合。
此外,EREG还参与调节细胞信号传导。它能够激活EGFR,进而激活下游的信号通路,如MAPK和PI3K/Akt通路,促进细胞的生长和存活。在胚胎发育过程中,EREG对于器官形成和组织分化也具有重要意义。
EREG与疾病
EREG在多种疾病中表现出异常的表达水平。例如,在某些癌症中,EREG的表达显著升高,与肿瘤的增殖和侵袭密切相关。研究表明,EREG能够通过激活EGFR信号通路,促进肿瘤细胞的生长和存活。此外,EREG在心血管疾病和神经退行性疾病中也表现出异常的表达,可能参与这些疾病的发生和发展。
微球菌核酸酶本身是一种能够降解核酸的酶,具有高效、特异性强的特点。
2× RNA上样缓冲液是一种专为RNA电泳设计的浓缩缓冲液,广泛用于变性和非变性RNA凝胶电泳。它能够帮助RNA样品在电泳过程中沉入凝胶孔中,并通过染料指示电泳进程。
组成成分
该缓冲液的主要成分包括:
甲酰胺:用于变性RNA,确保RNA在电泳中以单链形式迁移。
溴酚蓝和二甲苯青:作为电泳指示剂,分别指示约500个碱基和5000个碱基的RNA迁移速率。
EDTA:螯合金属离子,防止RNA降解。
使用方法
样品混合:将RNA样品与2× RNA上样缓冲液按等体积混合(例如5μL RNA样品+5μL缓冲液)。
变性处理:将混合后的样品在65-70℃加热5-10分钟,然后立即冰上冷却。
上样与电泳:将处理后的样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。
优势
适用范围广:适用于总RNA、小RNA及特定RNA的电泳。
兼容性强:可用于变性或非变性的琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
无RNase污染:确保RNA样品的完整性。
注意事项
避免RNase污染:使用无RNase的耗材,操作时戴口罩和手套。
分装保存:建议分装后保存于-20℃,避免反复冻融。
毒性防护:甲酰胺有毒性,操作时需做好防护。

尽管RNase T1在RNA研究中具有广泛的应用,但其活性和反应条件需要精确控制。
白细胞介素 - 11(IL - 11)是一种多功能细胞因子,在人体的生理调节和疾病治疗中发挥着重要作用。它主要由多种细胞产生,包括成纤维细胞、内皮细胞和免疫细胞等,参与调节细胞增殖、分化和存活。
IL - 11 的生物学功能
IL - 11 在造血过程中具有重要的调节作用。它能够刺激骨髓中多种造血细胞的增殖和分化,特别是对巨核细胞和血小板的生成有显著的促进作用。因此,IL - 11 在治疗血小板减少症等血液疾病中具有潜在的应用价值。此外,IL - 11 还可以调节免疫细胞的功能,如增强巨噬细胞的吞噬能力,促进 T 细胞和 B 细胞的存活和增殖,从而在免疫应答中发挥重要作用。
重组人 IL - 11(CHO - expressed)的应用
重组人 IL - 11 是通过基因工程技术,利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO 细胞)表达系统生产的。这种表达系统具有高效表达、稳定性和生物活性高的优点,能够生产出与天然 IL - 11 具有相似生物活性的重组蛋白。

在人体复杂而精妙的免疫系统中,白细胞介素 - 7(IL - 7)扮演着至关重要的角色。
T4 RNA连接酶1(T4 RNA Ligase 1)是一种ATP依赖的酶,能够催化单链RNA、单链DNA或单核苷酸分子间或分子内5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。这种酶在RNA分子间的连接效率最高,其次为DNA与RNA之间的连接,而DNA分子间的连接效率最低。
工作原理
T4 RNA连接酶1的催化过程包括三个步骤:
酶与ATP反应,生成酶-AMP中间产物并释放焦磷酸。
AMP从中间产物转移到核酸的5'磷酸末端,形成腺苷酰化核酸中间产物。
另一核酸的3'羟基进攻腺苷酰化核酸中间产物的5'磷酸末端,形成3'-5'磷酸二酯键并释放AMP。
产品特点
高纯度与稳定性:蛋白纯度超过99%,酶活性高,稳定性好。
无核酸酶污染:经过DEPC处理,确保无RNase、DNase和蛋白酶污染。
适用范围广:可用于RNA和RNA之间的连接、RNA和单核苷酸之间的连接(用于3'末端标记)、RNA和DNA之间的连接,以及DNA的环化连接。
应用场景
miRNA检测:通过将miRNA首尾相连形成circRNA,结合RT-qPCR技术,提高检测灵敏度。
能够连接DNA和RNA杂合双链,用于生成DNA-RNA和RNA-DNA融合链接。
白细胞介素-4(IL-4)是一种重要的细胞因子,在人类免疫系统中发挥着关键的调节作用。它主要由活化的T细胞和肥大细胞产生,对免疫系统的多种细胞具有广泛的影响,尤其在调节体液免疫和细胞免疫平衡中起着至关重要的作用。
IL-4的生物学功能
IL-4在人类免疫系统中的主要功能包括:
促进Th2细胞分化:IL-4能够促进辅助性T细胞(Th0)向Th2细胞分化,抑制Th1细胞的发育。Th2细胞主要参与体液免疫反应,通过分泌细胞因子如IL-4、IL-5和IL-13,促进B细胞的增殖、分化和抗体的产生。
增强B细胞功能:IL-4能够直接作用于B细胞,促进其增殖和分化,增强B细胞的抗体产生能力。此外,IL-4还能诱导B细胞产生IgG1和IgE抗体,这对于过敏反应和寄生虫感染的免疫反应尤为重要。
调节巨噬细胞功能:IL-4能够抑制巨噬细胞的活性,减少其产生促炎细胞因子(如IL-1、IL-6和TNF-α),从而减轻炎症反应。这种调节作用有助于防止过度的炎症损伤。
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