缓冲液应保存在室温下,避免光照和污染。由于甲酰胺具有一定的挥发性,建议在使用后立即密封保存。
T4 RNA连接酶2截短型(突变型)是一种经过基因工程改造的酶,通过引入R55K和K227Q双点突变,显著降低了非特异性连接背景,同时保持了高效的连接活性。这种酶能够特异性地将5'端预腺苷化的DNA或RNA连接到RNA的3'末端,无需ATP参与反应。
特点
高效连接:突变型酶在保持高效连接活性的同时,减少了RNA串联或自连成环等非特异性连接问题。
无需ATP:连接反应不依赖ATP,降低了背景连接。
高纯度:经过严格测试,确保无核酸外切酶、切口酶或RNase残留。
稳定性高:在-20℃条件下可保存3年,避免反复冻融。
应用
T4 RNA连接酶2截短型(突变型)广泛应用于以下领域:
小RNA文库构建:用于二代测序(NGS)中的miRNA、siRNA和piRNA文库构建。
cDNA文库构建:将单链腺苷化引物连接至小RNA上。
链特异性cDNA文库构建:用于合成链特异性的cDNA文库。
使用方法
反应条件:在1×反应缓冲液中,25℃温育。
灭活条件:65℃加热20分钟。
反应体系:通常需要加入PEG 8000以提高连接效率。
在基因工程和分子克隆领域,5' DNA腺苷酰化试剂盒具有广泛的应用。
白细胞介素-3(IL-3)是一种重要的造血生长因子,广泛参与造血细胞的增殖、分化和存活。通过CHO(中国仓鼠卵巢)细胞表达技术生产的重组人IL-3(Human IL-3, CHO-expressed),为研究人员提供了一个高效、稳定的工具,用于深入研究IL-3的生物学功能及其在疾病中的作用。
IL-3的生物学功能
IL-3主要由T细胞和肥大细胞产生,是一种多效性细胞因子。它通过与其受体结合,促进多种造血细胞的增殖和分化,包括粒细胞、单核细胞、巨核细胞和红细胞的前体细胞。IL-3在维持骨髓造血功能中起着关键作用,能够支持造血干细胞的存活和增殖,促进其向成熟血细胞的分化。此外,IL-3还能增强免疫细胞的功能,如促进巨噬细胞的吞噬作用和自然杀伤细胞(NK细胞)的细胞毒性。
CHO细胞表达的优势
CHO细胞是一种广泛用于重组蛋白生产的细胞系,具有以下优点:
高产量:CHO细胞能够高效表达重组蛋白,使得IL-3的生产更加经济高效。
高纯度:通过先进的纯化技术,重组IL-3的纯度可以达到很高水平,减少了杂质和潜在的免疫原性。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
核酸内切酶VIII(Endonuclease VIII,Endo VIII)是一种具有N-糖基化酶和AP-裂解酶活性的DNA损伤修复酶,广泛应用于基因损伤修复研究。其截短体则是通过基因工程改造,删除部分氨基酸序列而获得的变体,通常用于特定的研究目的,如提高酶的稳定性或特异性。
功能与特性
N-糖基化酶活性:识别并切除双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生脱嘌呤(AP)位点。
AP-裂解酶活性:在AP位点的3'和5'端切割磷酸二酯键,产生具有3'和5'磷酸的碱基缺口。
高纯度与稳定性:核酸内切酶VIII截短体通过重组表达获得,纯度高,无核酸外切酶、核酸内切酶和RNase残留。
热失活:75℃孵育10分钟可使酶失活。
应用场景
DNA损伤修复研究:用于模拟和修复DNA损伤,特别是在氧化损伤研究中。
单细胞凝胶电泳(彗星试验):评估细胞内和体外的氧化DNA损伤。
NGS建库:在二代测序中,特异性切除含AP位点的模板链,实现双端测序。
酶法合成DNA:释放DNA链,用于合成特定的DNA结构。

因此,重组大鼠 IL - 10 有望成为一种新型的免疫治疗药物,用于增强机体的抗肿瘤免疫反应。
GTBE电泳缓冲液(10×)是一种专为DNA电泳设计的高浓度缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它由甘氨酸和TBE(Tris-Borate-EDTA)组成,特别适用于脉冲场凝胶电泳(PFGE)。产品特性成分:主要由甘氨酸、TBE缓冲液(Tris-Borate-EDTA)和防腐剂组成。缓冲能力:缓冲能力较弱,特别适合分离小于2000 bp的DNA片段。
即用型设计:10×浓缩液,使用时需用去离子水稀释10倍至1×后使用。稳定性高:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释缓冲液:将10×GTBE缓冲液用去离子水稀释10倍,制备1×工作液。制备凝胶:使用1×GTBE缓冲液制备琼脂糖凝胶。电泳操作:将样品加入凝胶加样孔中,进行电泳。电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的DNA染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察DNA条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,开封后尽快使用,有效期为12个月。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
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DNAMarkerIplus在4℃条件下可稳定保存3个月-20℃下可长期保存这种稳定性确保可靠性
在生物医学研究中,白细胞介素-1β(IL-1β)是一种关键的促炎细胞因子,广泛参与免疫反应和炎症过程。猕猴(Rhesus Macaque)作为与人类基因高度相似的非人灵长类动物,是研究人类免疫系统和疾病机制的重要模型。因此,猕猴IL-1β的研究对于理解人类炎症和免疫反应具有重要意义。
IL-1β的生物学功能
IL-1β主要由巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞等产生,是炎症反应的主要启动因子之一。它通过与细胞表面的IL-1受体结合,激活多种信号通路,如NF-κB和MAPK通路,从而诱导多种炎症相关基因的表达。这些基因编码的蛋白能够促进炎症细胞的招募、激活和增殖,增强炎症反应。此外,IL-1β还能刺激其他细胞因子的释放,进一步放大炎症信号。
猕猴模型的重要性
猕猴的免疫系统与人类高度相似,这使得它们成为研究人类免疫反应和疾病机制的理想模型。在猕猴模型中,IL-1β的研究为理解人类炎症和免疫反应提供了重要线索。例如,通过在猕猴中研究IL-1β的作用机制,科学家们可以更好地理解炎症反应的启动和进展,以及如何调节这些反应以治疗炎症性疾病。
在现代生物医学研究的前沿阵地,BD-3 与小鼠共同开启了一场充满希望与挑战的探索之旅。
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。
泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
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