如果凝胶中预先加入 EB,电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱,可通过凝胶后染方法
在分子生物学实验中,DNA的完整性和准确性是实验成功的关键。Uracil-DNA Glycosylase(UDG)是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶,广泛应用于PCR反应和其他DNA合成实验中。然而,传统的UDG在反应结束后需要额外的处理步骤来失活酶活性,以防止对后续实验的干扰。热敏感型UDG(Heat-labile UDG,1U/μl)的出现,为这一问题提供了高效的解决方案。
热敏感型UDG的独特特性
热敏感型UDG(Heat-labile UDG)是一种经过工程改造的UDG,来源于细菌。与传统的UDG不同,这种酶在高温条件下(通常在95℃)会迅速失活。这一特性使其在PCR反应中具有显著优势。在反应开始前,UDG可以有效去除引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在PCR反应的高温变性步骤中,UDG会自动失活,无需额外的处理步骤,从而简化了实验流程。
热敏感型UDG的应用
热启动PCR:在PCR反应中,热敏感型UDG可以用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在反应前加入UDG,可以降解引物中的尿嘧啶,从而避免引物在反应前的非特异性结合。
使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合
溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)是一种专为核酸电泳设计的上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由溴酚蓝、二甲苯青FF和蔗糖组成,能够为核酸电泳提供清晰的指示和稳定的环境。产品特性成分:主要由0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF和15%蔗糖组成。指示剂:溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,稀释后比重较大,加样后易下沉,颜色清晰可见,便于观察电泳进程。保存条件:室温避光保存,有效期为3个月。
使用方法稀释:通常按1:5的比例将2×溴酚蓝蔗糖溶液稀释至1×使用。电泳操作:将稀释后的缓冲液与核酸样品混合后直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。溴酚蓝蔗糖溶液(0.25%)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为核酸电泳实验中的理想选择。
10 mg/ml EB溶液凭借其高灵敏度和操作简便性,成为核酸电泳实验中的重要工具。
在分子生物学研究和临床检测中,多重实时荧光定量PCR(qPCR)技术因其能够同时检测多个靶标而备受关注。然而,多重qPCR实验的成功依赖于高特异性、高灵敏度以及可靠的防污染体系。Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)凭借其卓越的性能,成为实现这一目标的理想选择。
该试剂盒是一种2×预混液,专为多重qPCR设计,支持探针法进行高效的基因定量分析。它含有化学修饰的热启动Taq DNA聚合酶、优化的反应缓冲液、dNTPs以及UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)。UDG通过降解含有尿嘧啶的DNA,有效防止了PCR产物的气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。
此外,该试剂盒还采用了dUTP替代dTTP的技术,进一步提高了反应的特异性,减少了非特异性扩增的可能性。其优化的反应体系能够支持多达四重的qPCR反应,大大提高了实验效率。
Multiplex Probe qPCR Mix (2X, UDG Plus)不仅操作简便,还具有广泛的适用性。它适用于多种qPCR仪器平台,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Eppendorf等品牌。

dNTP Mix是一种由 dATP、dCTP、dGTP 和 dTTP 组成的等摩尔混合溶液
DL2000 DNA Marker是一种广泛应用于琼脂糖凝胶电泳的DNA分子量标准,由特定长度的双链DNA片段组成,可用于估算DNA片段的大小。产品特性DL2000 DNA Marker通常包含6条双链线状DNA条带,分别为100 bp、250 bp、500 bp、750 bp、1000 bp和2000 bp。其中,750 bp条带的浓度通常较高(约100 ng/5 µL),便于观察和作为参考。该Marker已预混有1×Loading Buffer,可直接用于电泳,使用方便。使用方法
电泳条件:建议在1.0% - 2.0%的琼脂糖凝胶中使用,电泳缓冲液可选用1×TAE或0.5 - 1×TBE。电压一般控制在5 - 10 V/cm,电泳时间根据凝胶浓度和电压调整。
上样量:通常每次取5 µL加入凝胶加样孔中。如果加样孔较宽,可适当增加上样量。
染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。保存条件短期保存:4℃可保存6个月。长期保存:-20℃可保存1 - 2年。避免反复冻融:反复冻融可能导致条带降解,影响电泳效果。

其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。
Bst Plus DNA Polymerase 是一种经过基因工程改造的嗜热DNA聚合酶,来源于 Thermophilic Geobacillus sp. DNA Polymerase I,去除了其5′→3′核酸外切酶活性。该酶具有强大的5′→3′ DNA聚合酶活性、链置换活性以及对dUTP的耐受性,非常适合用于防污染的等温扩增反应。产品特性高灵敏度:在LAMP等温扩增反应中,灵敏度低至50 copies/T,反应时间小于15分钟。耐盐性和热稳定性:相比野生型Bst DNA聚合酶,Bst Plus在耐盐性和热稳定性方面表现更优,能够在65℃的等温条件下高效工作。dUTP耐受性:具有较高的dUTP耐受性,适合防污染的等温扩增反应。应用场景Bst Plus DNA Polymerase 广泛应用于以下领域:环介导等温扩增(LAMP):快速、灵敏地检测病原体,适用于现场检测和即时诊断。链置换扩增(SDA):用于高灵敏度的核酸扩增。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。使用方法储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。
在分子生物学研究和临床检测中,快速、准确地检测RNA序列是许多实验的关键。
在分子生物学和生物化学研究中,DNA合成是一个核心过程,而dITP(脱氧肌苷三磷酸)作为一种特殊的核苷酸,为DNA合成提供了独特的可能性。dITP, 100 mM Solution是一种高浓度的脱氧肌苷三磷酸溶液,它在某些特定的实验中发挥着不可替代的作用。dITP的独特性质dITP是一种含有肌苷(Inosine)的脱氧核苷三磷酸。肌苷是一种次黄嘌呤核苷,其碱基部分与腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G)都能形成稳定的碱基配对。这种特性使得dITP在DNA合成中具有独特的应用价值。例如,在某些需要引入“通用碱基”的实验中,dITP可以替代传统的dATP或dGTP,从而增加DNA合成的灵活性和通用性。应用场景dITP, 100 mM Solution在以下几种实验中表现出色:通用引物设计:在某些需要设计通用引物的实验中,dITP可以替代传统的dATP或dGTP。由于肌苷能够与A和G配对,这种引物可以与多种模板序列结合,从而提高引物的通用性和适用范围。DNA标记:在DNA标记实验中,dITP可以用于引入特定的标记基团。例如,通过化学修饰将荧光基团或生物素连接到肌苷上,从而实现对DNA的特异性
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