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成纤维细胞生长因子9(FGF-9)是成纤维细胞生长因子(FGF)家族的重要成员,广泛参与细胞增殖、分化、迁移和存活等过程。FGF-9在胚胎发育、组织修复和癌症发生中发挥着关键作用,是生物医学研究中的重要对象。
FGF-9的结构与功能
FGF-9是一种小分子多肽,由208个氨基酸组成,具有高度的保守性和生物活性。它通过与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)结合,激活一系列细胞内信号通路,如Ras-MAPK、PI3K-Akt和PLC-γ通路,从而促进细胞的增殖和分化。FGF-9还能够调节细胞外基质的合成和重塑,对组织的形成和修复具有重要作用。
在胚胎发育中的作用
FGF-9在胚胎发育过程中发挥着关键作用。它能够促进细胞的增殖和迁移,对器官的形成和发育至关重要。例如,在胚胎干细胞(ESC)中,FGF-9能够维持干细胞的自我更新能力,同时促进其向特定细胞类型的分化。此外,FGF-9还参与神经系统的发育,对神经细胞的增殖和分化具有重要影响。
在组织修复中的作用
FGF-9在组织修复和再生中也发挥着重要作用。
在特定的缓冲液条件下,核酸会吸附到磁珠表面,而杂质(如蛋白质、引物、dNTP等)则被洗去。
PAR-4 Agonist Peptide, amide(简称PAR-4-AP;AY-NH2)是一种特异性激活蛋白酶激活受体-4(Protease-Activated Receptor 4,PAR-4)的多肽激动剂。它对PAR-1或PAR-2没有作用,且其激活效应可以被PAR-4拮抗剂有效阻断。这种高度选择性使得PAR-4-AP成为研究PAR-4功能及其在多种生理和病理过程中作用的理想工具。
结构与特性
PAR-4-AP的分子式为C34H48N8O7,分子量约为680.8。其序列是AYPGKF-NH2,这种序列设计基于PAR-4受体的自然激活机制,能够模拟蛋白酶切割PAR-4 N-末端后暴露的特定序列,从而触发细胞内信号转导级联反应。
作用机制与应用
PAR-4作为G蛋白偶联受体(GPCR)家族的一员,在多种生理和病理过程中发挥关键作用,包括血小板聚集、炎症反应、细胞凋亡以及肿瘤生长与转移等。PAR-4-AP通过特异性结合并激活PAR-4,可用于研究这些复杂过程。例如,在心血管疾病、炎症性疾病或肿瘤治疗中,通过调节PAR-4的活性,可能实现疾病状态的改善或逆转。
在人体复杂而精妙的免疫系统中,白细胞介素 - 7(IL - 7)扮演着至关重要的角色。
VEGF165(血管内皮生长因子165,小鼠)是VEGF家族中研究最为透彻的成员之一,它在血管生成、组织修复和胚胎发育中发挥着至关重要的作用。由于小鼠在生理和病理机制上与人类有许多相似之处,VEGF165(小鼠)成为研究血管生成和相关疾病的重要模型。
结构与功能
VEGF165由165个氨基酸组成,是VEGF家族中活性较高的成员之一。它主要通过与血管内皮细胞表面的VEGFR-2受体结合,激活下游信号通路,从而促进血管内皮细胞的增殖、迁移和存活。VEGF165在血管生成过程中起着核心作用,特别是在胚胎发育和组织修复过程中,它能够刺激新生血管的形成,为组织提供必要的营养和氧气。
血管生成与组织修复
VEGF165在血管生成和组织修复过程中起着至关重要的作用。在伤口愈合过程中,VEGF165能够刺激血管内皮细胞的增殖和迁移,加速新生血管的形成,从而为伤口愈合提供必要的营养和氧气。此外,VEGF165还能够促进神经再生,对神经损伤后的修复具有潜在的应用价值。
疾病研究与应用
VEGF165的异常表达与多种疾病的发生发展密切相关。
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研究PKG底物及其磷酸化过程通常需要使用多种生物化学和分子生物学技术。
T4 DNA聚合酶是一种来源于T4噬菌体的酶,具有独特的酶活性和广泛的应用价值。它能够催化DNA的5'→3'方向合成,同时具备3'→5'核酸外切酶活性,但不具有5'→3'核酸外切酶活性。这种酶在分子生物学实验中被广泛应用于多种场景。
工作原理
T4 DNA聚合酶的活性依赖于模板和引物的存在。它通过识别单链DNA模板上的引物,从5'端向3'端合成新的DNA链。此外,它还具有3'→5'外切酶活性,能够在没有dNTPs的情况下,按3'→5'方向降解双链DNA。这种外切酶活性在存在特定dNTP时会被抑制,例如当反应体系中仅存在dGTP时,酶会在遇到G碱基时停止降解。
应用
T4 DNA聚合酶在分子克隆中具有重要应用。例如,在In-Fusion克隆技术中,它利用3'→5'外切酶活性生成单链5'突出端,通过互补序列的退火实现DNA片段的无缝连接。此外,它还被用于DNA末端修饰,如将黏性末端转换为平末端,或在3'末端添加特定核苷酸。
在高通量测序(NGS)中,T4 DNA聚合酶用于文库构建,通过平滑DNA末端或添加特定序列,提高测序效率。它还被用于位点特异性突变、DNA末端标记等应用。

肝素结合肽还可以用于开发新型的生物材料,如组织工程支架。
微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)是一种来源于金黄色葡萄球菌的核酸内切酶,具有广泛的生物技术应用价值。它能够在pH 7-10和Ca²⁺存在的条件下,降解单链、双链、线状和环状等多种形式的DNA和RNA,产生3'磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸。
在染色质免疫沉淀实验(ChIP)中,MNase被广泛用于染色质片段化。它能够特异性地消化核小体间连接区域的裸露DNA,而核小体核心颗粒中的DNA因受组蛋白保护而抵抗酶解,从而完整保留与目标蛋白结合的DNA片段。这种方法比传统的超声波片段化更具特异性,且温和,能显著提升实验分辨率。此外,MNase在核小体定位研究中也发挥重要作用,通过MNase-seq技术,研究人员可以绘制多种生物的核小体图谱,揭示核小体组织的特点及其在基因表达调控中的作用。
MNase还被用于降解蛋白制剂中的核酸,以减少核酸污染。在基因组测序领域,MNase能够快速切割DNA,生成适合测序的片段,提高测序效率。此外,MNase在抗菌领域也有应用,例如通过设计特定的寡核苷酸序列,利用MNase的酶解特性,实现抗生素在感染部位的响应性释放。
电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
磁珠法质粒小量抽提试剂盒是一种基于磁性纳米技术的核酸纯化工具,结合了经典的SDS碱裂解法和磁珠吸附技术,能够从大肠杆菌中快速、高效地提取高质量的质粒DNA。工作原理该试剂盒利用磁珠表面修饰的官能团,在高盐条件下特异性吸附质粒DNA,而杂质如蛋白质、盐离子等则通过洗涤液被去除。当条件改变时,质粒DNA从磁珠表面洗脱下来,从而实现快速分离和纯化。产品特点高效提取:从2 mL过夜培养的菌液(OD600 = 2.0)中可获得超过15 μg的高拷贝质粒DNA。操作简便:无需多次离心,整个提取过程可在1小时内完成,适合高通量操作。纯度高:提取的质粒纯度高,OD260/OD280比值一般为1.8-1.9,OD260/OD230比值大于2.0,可直接用于下游实验。自动化兼容:可与自动化核酸提取仪配合使用,实现完全自动化操作。
应用场景提取的质粒DNA可用于多种下游应用,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等分子生物学实验。使用方法菌液处理:取适量菌液离心,弃上清后用裂解液悬浮细菌沉淀。裂解与吸附:加入裂解液和中和液,裂解细胞后加入磁珠,吸附质粒DNA。
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