在反应体系中加入PEG 6000可以显著提高其对平末端的连接效率。
Gel-Red是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB)。它具有与EB相同的光谱特性,能够在不改变现有成像系统的情况下直接替换EB。产品特性安全性高:Gel-Red是一种油性大分子(分子量>1000),难以穿透细胞膜,显著降低了细胞毒性和致突变性。灵敏度高:检测灵敏度比EB高8-10倍,尤其对小分子量DNA的检测更为灵敏。稳定性好:室温下稳定,可耐受微波加热,光稳定性强,操作无需避光。适用范围广:适用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,可用于dsDNA、ssDNA和RNA的染色。使用方法胶染法(前染法):制备琼脂糖凝胶时,按1:10000的比例加入Gel-Red(例如,50 mL凝胶溶液中加入5 µL 10000×Gel-Red),混匀后倒胶。按常规方法进行电泳。泡染法(后染法):电泳后,将凝胶放入染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Red稀释3300倍),室温振荡染色30分钟。染色液可重复使用3次,4°C或室温避光保存1周。注意事项Gel-Red对玻璃和非聚丙烯材料有亲和力,建议使用聚丙烯容器。
它能够确保miRNA在电泳过程中保持单链状态,从而获得清晰的电泳条带,便于后续分析。
磁珠法mRNA纯化试剂盒是一种基于磁珠分离技术的高效工具,广泛应用于从总RNA中快速纯化mRNA。该试剂盒利用磁珠表面的Oligo(dT)序列与mRNA的poly(A)尾特异性结合,通过磁场分离和洗涤步骤,最终获得高纯度的mRNA。
工作原理
磁珠法mRNA纯化试剂盒的核心是磁珠表面修饰的Oligo(dT)序列。这些序列能够特异性结合mRNA的poly(A)尾,通过磁力作用实现快速分离。具体步骤包括:
磁珠结合:将总RNA与Oligo(dT)磁珠混合,使磁珠上的Oligo(dT)与mRNA的poly(A)尾结合。
磁力分离:通过磁力架将磁珠与溶液分离,去除未结合的杂质。
洗涤:用洗涤缓冲液去除残留杂质。
洗脱:用洗脱液将mRNA从磁珠上洗脱下来。
优势
高纯度:纯化后的mRNA纯度高,适合多种下游实验,如RT-qPCR、高通量测序等。
快速高效:整个纯化过程通常在15分钟内完成。
操作简便:所有操作均在同一个离心管中完成,无需复杂设备。
适用范围广:适用于动物、植物、细菌等多种生物样本。
注意事项
磁珠保存:磁珠应避免冷冻或干燥,使用前需恢复至室温并充分混匀。
EB与双链DNA结合后荧光强度可增强25倍与双链RNA结合后荧光强度增强21倍这种特性使其能够检测到
全能核酸酶(Benzonase Nuclease)是一种源自粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的重组核酸内切酶,经过基因工程改造,能够高效降解所有形式的DNA和RNA,包括单链、双链、线状、环状和超螺旋结构。这种酶因其广泛的核酸降解能力和高效性,被广泛应用于生物制药和基础科研领域。
特性与优势
广谱降解能力:无差别切割所有形式的DNA和RNA,将其降解为2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸。
高活性与稳定性:在多种条件下(如高盐、高尿素、SDS等)仍保持高效活性。
无蛋白酶活性:不具有蛋白水解活性,不会对蛋白质样品造成损伤。
高纯度:通过基因工程在大肠杆菌中表达纯化,纯度超过99%,无内毒素污染。
应用场景
去除核酸污染:在蛋白纯化过程中,全能核酸酶可有效去除核酸污染,降低溶液粘度,提高蛋白提取效率。
细胞裂解液处理:在细胞裂解后,全能核酸酶能够降解释放的核酸,减少溶液粘度,便于后续操作。
疫苗和病毒样品制备:用于去除疫苗和病毒样品中的DNA污染,确保生物制品的安全性和功效。
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Fast T4 DNA连接酶的反应条件经过优化,能够在短时间内实现高效连接。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,某些qPCR仪器(如ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了高效的探针法qPCR反应体系和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。
低浓度ROX的必要性
在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。某些qPCR仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)中的ROX浓度经过精确调整,适用于这些需要低浓度ROX的仪器,同时避免了高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。
产品特点
优化的反应体系:Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及其他必要的成分。
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它是一种内切酶,能够特异性地识别DNA-RNA杂交双链中的RNA部分,并在RNA链上切割磷酸二酯键。
蛋白A-微球菌核酸酶(Protein A-MNase,简称pA-MNase)是一种融合蛋白,由Protein A和微球菌核酸酶(Micrococcal Nuclease,MNase)组成。它兼具Protein A的抗体结合活性和MNase的核酸内切酶活性,广泛应用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。
特性与优势
高活性:pA-MNase具有高效的核酸内切酶活性,能够在短时间内将DNA降解为单核苷酸和寡核苷酸。
抗体结合能力:Protein A能够特异性结合免疫球蛋白的Fc区,使得pA-MNase可以被引导至目标蛋白所在的染色质区域。
低细胞需求量:适用于低至50个细胞的实验,尤其适合早期胚胎、干细胞和肿瘤等研究领域。
操作简便:实验流程简单,从细胞到二代测序文库的转化仅需1天。
应用场景
pA-MNase主要用于CUT&RUN(Cleavage Under Targets and Release Using Nuclease)技术,这是一种替代传统ChIP-Seq的新技术,用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。
Hot-Start Taq Master Mix采用了独特的热启动技术,确保Taq酶在低温下无活性
甲酰胺加样缓冲液(2×)是一种专为RNA电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成,能够为RNA电泳提供稳定的环境和清晰的指示。产品特性成分:主要由去离子甲酰胺、溴酚蓝、EDTA等组成。指示剂:以溴酚蓝为指示剂,稀释至1×后比重仍然较大,加样后易下沉,且颜色清晰可见。保存条件:2-8℃避光保存,有效期为1年。使用方法稀释:将2×甲酰胺加样缓冲液与RNA样品等比例混合,稀释至1×使用。电泳操作:将混合后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项避免RNase污染:实验过程中需佩戴无RNase手套,避免使用可能含有RNase的耗材。个人防护:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。
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