因此,该缓冲液不仅适用于常规的DNA电泳,还特别适合用于终止酶促反应后的样品分析。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,确保实验结果的准确性和可靠性是至关重要的。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,为研究人员提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案,特别适用于需要高特异性和高灵敏度的实验场景。
低浓度ROX与UDG技术的双重优势
SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)整合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于某些需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
产品特点
低浓度ROX校正:该试剂盒中的ROX浓度经过优化,适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,同时避免高浓度ROX可能带来的背景荧光干扰。
上样与电泳:混合均匀后,将样品加入琼脂糖凝胶的加样孔中,进行电泳。
在分子生物学的研究中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的挑战之一。然而,随着Ultra-Long DNA Polymerase的出现,这一难题得到了有效解决。Ultra-Long DNA Polymerase以其卓越的长片段扩增能力和高保真性,成为了现代分子生物学实验中的强大工具。
Ultra-Long DNA Polymerase是一种专门针对长片段DNA扩增而设计的聚合酶。它结合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。例如,在研究大型基因或基因簇时,Ultra-Long DNA Polymerase能够提供完整的基因序列信息,避免因片段过短而导致的拼接错误。
除了长片段扩增能力外,Ultra-Long DNA Polymerase还具有高保真性。它通过内置的3'到5'外切酶活性,能够在DNA合成过程中纠正错误配对的碱基,从而显著提高扩增产物的准确性。
SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具
ris-磷酸电泳缓冲液(10×TPE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、磷酸和EDTA组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由900 mM Tris-磷酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TPE工作液含有90 mM Tris-磷酸和2 mM EDTA,pH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TPE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TPE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。注意事项沉淀处理:如果出现沉淀,可置于37℃水浴中使其溶解,不影响使用。
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Probe qPCR Mix 采用快速反应体系,能够在短时间内完成扩增反应,大大提高了实验速度
在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。
Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。
与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
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6×DNA 在不同浓度的琼脂糖凝胶中,溴酚蓝和二甲苯青的迁移速率稳定,为实验提供可靠的参考
Tn5转座酶是一种能够高效切割并插入DNA的酶,广泛应用于基因组编辑和高通量测序文库构建。它通过识别特定的DNA序列并将其插入到目标DNA中,实现基因组的“跳跃”和重组。
工作原理
Tn5转座酶的工作原理包括以下几个步骤:
复合物形成:两个Tn5转座酶分子结合到供体DNA的转座子的ME序列,形成复合物。
切割与插入:在Mg²⁺存在的情况下,Tn5转座酶切割供体DNA,并将其插入到靶DNA中,形成转座后的DNA序列。
结果:切割形成的9bp粘性末端可通过DNA聚合酶和连接酶填补,最终形成9bp正向重复序列。
应用场景
NGS文库构建:Tn5转座酶能够将DNA片段化并直接连接测序接头,简化了传统的文库构建步骤,显著提高了建库效率。
单细胞测序:通过LIANTI技术,Tn5转座酶可用于单细胞DNA建库,实现微量DNA的高效扩增。
ATAC-seq:用于研究染色质可及性,通过将DNA序列插入开放的染色质区域,检测全基因组范围内的染色质开放程度。
CUT&Tag:结合Protein A/G,Tn5转座酶可用于切割靶蛋白结合的染色质区域,并直接插入测序接头,用于研究蛋白质-DNA相互作用。
这种试剂的独特之处在于其2×浓度的配方设计,使得实验操作更加便捷高效。
Gel-Red是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB)。它具有与EB相同的光谱特性,能够在不改变现有成像系统的情况下直接替换EB。产品特性安全性高:Gel-Red是一种油性大分子(分子量>1000),难以穿透细胞膜,显著降低了细胞毒性和致突变性。灵敏度高:检测灵敏度比EB高8-10倍,尤其对小分子量DNA的检测更为灵敏。稳定性好:室温下稳定,可耐受微波加热,光稳定性强,操作无需避光。适用范围广:适用于琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,可用于dsDNA、ssDNA和RNA的染色。使用方法胶染法(前染法):制备琼脂糖凝胶时,按1:10000的比例加入Gel-Red(例如,50 mL凝胶溶液中加入5 µL 10000×Gel-Red),混匀后倒胶。按常规方法进行电泳。泡染法(后染法):电泳后,将凝胶放入染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Red稀释3300倍),室温振荡染色30分钟。染色液可重复使用3次,4°C或室温避光保存1周。注意事项Gel-Red对玻璃和非聚丙烯材料有亲和力,建议使用聚丙烯容器。
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